冷凍保存哺乳動物細胞在生物學(xué)研究中非常有價值和普遍。為了防止技術(shù)原因(培養(yǎng)操作)使細胞污染或物理原因(培養(yǎng)箱故障)使長期培養(yǎng)功虧一簣。此外,長期多次的培養(yǎng)和傳代,導(dǎo)致細胞在遺傳學(xué)性狀上的老化和分化都是促使在接收或生成新細胞系后首要考慮的適宜策略就是凍存細胞。低溫凍存對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。細胞深低混保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0℃到-20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。
如何減少或者避免冰晶形成,如同凍存細菌時用的甘油,DMSO(二甲基亞砜)是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損書,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。凍存液中加入后可以使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)的水分逐漸透出,從而減少了冰晶的形成,從而避免細胞的損傷。這就是為什么低溫凍存細胞時為什么要采用慢凍的一個重要原因。
一旦從生長培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到冷凍培養(yǎng)基中,就要執(zhí)行慢凍的過程。盡管冷凍細胞系是通常執(zhí)行的程序,但是當(dāng)沒有合適的冷凍器縣時,或者由于存在血清,額外洗滌或操作不當(dāng)時,就會出現(xiàn)問題。當(dāng)然,這個問題是在細胞復(fù)蘇(快融)后才發(fā)現(xiàn)的,發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇后的細胞大部分感者全部都是死細胞,甚至還有不容易發(fā)現(xiàn)的整個凍存過程的不當(dāng)導(dǎo)致的細胞分化。
針對上述細胞凍存過程中的痛點,今天我們帶來NIPPON Genetics品牌的一款認可的BambankerTM無血清細胞凍存液。BambankerTM細胞凍存液允許直接將細胞在-80℃或液氮中冷凍保存,從而避免了對額外設(shè)備的需求,并且也避免了耗時且復(fù)雜的梯度逐漸冷凍方案。
同時,Bambanker是一款無血清、無動物源且成分明確的即用型細胞凍存液,適用幾乎所有類型細胞株,包括原代細胞、干細胞、淋巴細胞以及常規(guī)細胞系等,該產(chǎn)品已在上百篇同行評審出版物中被引用,獲得全球用戶的認可。目前,JCRB細胞庫用Bambanker凍存超過1400種不同細胞系,凍存超過5年后的細胞復(fù)蘇活率仍可達到80%以上。相比于傳統(tǒng)添加血清的細胞凍存方法,用Bambanker凍存細胞有很大的優(yōu)勢。
BambankerTM無血清細胞凍存液特點:
Bambanker凍存液采用無動物源配方,成分明確,避免支原體、病毒等不確定來源成分的污染
能滿足細胞在-80°C 或-196°C低溫條件下長期穩(wěn)定保存
Bambanker為即用型細胞凍存液,無需稀釋、無需程序降溫步驟
Bambanker能有效提高復(fù)蘇后的細胞活率
GMP生產(chǎn)標準
適用于所有細胞系
產(chǎn)品效期長,在2-10℃可保存2年
Bambanker凍存液的使用方法也非常簡單,如下圖所示,無需程序降溫步驟,滿足細胞在-80℃條件下長時間穩(wěn)定保存。
BambankerTM相較于含血清凍存液的優(yōu)勢:
所有BambankerTM產(chǎn)品均不含血清。含有血清的冷凍保存培養(yǎng)基具有回收率波動和成分不確定的缺點。凍存于含血清的培養(yǎng)基中的細胞的實驗可重復(fù)性可能會受到批次之間血清差異的影響,因為蛋白質(zhì)和其他生物分子的組成和濃度會隨每批血清而變化。解凍和使用這種含血清培養(yǎng)基的細胞時,可能會導(dǎo)致問題。因為Bambanker"的每種成分都經(jīng)過仔細定義,因此您可以放心,在不同時間存儲的細胞都將有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化:
不期望的細胞分化也可能是冷凍細胞長期保存的一個問題。 所有Bambanker試劑均旨在盡可能地減少此問題。 對于特別麻煩的細胞,Bambanker不含DMSO的配方經(jīng)過特殊配制,可防止可能與含DMSO的冷凍保存試劑相關(guān)的問題。因此,請加入越來越多的實驗室的選擇,使用Bambanker保護其細胞系!
BambankerTM無血清細胞凍存液家族:
BambankerTM引用文獻(部分):
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2. S. Mieno et al., Characteristics and function of cryopreserved bone marrow-derived endothelial progenitor cells. The Annals of thoracic surgery85, 1361 (Apr, 2008).
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